Louis Comfort Tiffany a XIX. századi New York egyik leghíresebb ékszerész cége, a Tiffany & Co. tulajdonosa, Charles Lewis Tiffany és Harriet Olivia Avery Young gyermekeként született 1848. február 18-án New Yorkban. A Pennsylvaniai Katonai Akadémiára járt a pennsylvaniai Chesterben, majd az Eagleswoodi Katonai Akadémiára a New Jersey-i Perth Amboyban. Festészeti tanulmányait George Inness és Samuel Colman irányításával New York-ban, illetve Léon Bailly irányítása alatt Párizsban végezte. 1850-ben feleségül vette Mary Woodbridge Goddardot, akitől négy gyermeke született, Mary Woodbridge Tiffany, Charles Louis Tiffany I, Charles Louis Tiffany II, illetve Hilda Goddard Tiffany. Felesége 1884-ben meghalt, Tiffany később újraházasodott, Louise Wakeman Knoxot vette el, akitől szintén négy gyermeke született.
Fiatal korától érdeklődött a festészet iránt, később kiemelkedő festővé is vált, azonban valódi ismertséget az általa kifejlesztett díszüveg-technológia jóvoltából szerzett. 1875-ben kezdett el foglalkozni az üvegkészítéssel, több üvegház készítésénél is dolgozott Brooklynban 1875 és 1878 között. 1879-ben Candace Wheelerrel, Samuel Colmannel és Lockwood de Foresttel megalapította a Louis Comfort Companyt, mely magán- és nyilvános épületek díszítésével foglalkozott. Különleges üvegkészítési technikáját 1880-ban szabadalmaztatta. 1892-ben megalapította a Tiffany Glass and Decorating Companyt, amely festett üvegablakok és üvegmozaikok készítésére specializálódott. Az 1900-as párizsi világkiállításon mutatta be találmányát, az irizáló, valamint a több színben pompázó opalizáló üveget. Cége a következő években festett üvegablakokat, mozaikokat, lámpákat és ékszereket készített. Tiffany 1933. január 17-én halt meg New Yorkban.